1????

?????PCR????????????????μ?????????????????????????????????????????????????????PCR???????л?????????????????????PCR?????????????????????δ??????ж???????????????????????????PCR?????????????????????????PCR???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????о???????????????????????

2?????PCR?????????

?????PCR??PCR???????м???????????????????Щ??????????????????????????????PCR????????????PCR???????????????????????????????????δ??????ж??????????????????PCR????????????????????PCR????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????PCR???????????????????(cycle threshold value??Ct)???京??????PCR????????У??????????????????????????ε?????????????????????????????????Ct??????????????????????????????????????????Ct??С??????ò?????????????Ct??????????????????????????????????????????????δ????????????????

2.1?????PCR????????????????

?????PCR???????????????????????????????????????????????????????????PCR???????????????????????????????????￡????????????????????????????PCR????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????λ?????????????????????PCR?????????????????????塣

????????????????????????????????????ù???????????????????????????????????????????????PCR????????????????????????????GAPDH????-actin????2-??????rRNA???????????????????????1???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????2??2-????Ct???????????????????????Ч????????????????????????????????????Ct?????????????????????3?????????????PCR????У????????????????Ч??????????1????????????????????????????Ч??????????????????????????????漰??????????????????????δ???????????á?

??????????PCR?????У????????????????????????????????????????????????????У???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????PCR?????????????????????е?????????????????ж???????ε??С???????????PCR???????????????????????????????á?

2.2 ?????PCR??????????

???????PCR???????????????????????????????

????????DNA??????????????PCR???????м?????????????????????????DNA??????????????????????????·????????????????????????κ??????????????????????DNA???????????????PCR???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????PCR???????????γ??????????塢?????????????????????????????Ч?????????????????÷????????????????黷???????????????????????????????????????????????????????????????????SYBR Green I??

?????????????????5??~3?????к?????????DNA???????????????????????????????????÷?????????????岻???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????г???????????????У?TaqMan??Molecular Beacon??hybridization probe?????????TaqMan??????????????????????????????????

3?????PCR????????????????е????

?????????PCR???????????????????????????????????????????????????PCR????????????????С??ü???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????Σ??????????????????????????????????????????????????????????????PCR??????Takele?????????????????????PERV??TaqMan???????????PCR??????????????????????????????????????????з??????????????????У??????????г???Bumstead???1997?????????PCR???????????????????????????????????????????2003????ν??????????????????????????????PCR???????????????????????????????????????????????2006??????????PRRSV TaqMan?????RT-PCR??????????к??????????????2009????????????????е???2???PRRSV Nsp2??????ε??????仯????????????????????????PRRSV????????????PCR???????????????PCR????????????????????????????????磬???3?????????С??????????α????????????????????ü??????????????????о???????????????

?????????PCR?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????о??????????????????????????????????????о????????????????PCR?????????????????http://www.swzp.com/zdcp2.html